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實驗中細胞爬片的準備及操作
  • 發(fā)布日期:2024-06-17      瀏覽次數(shù):448
    • 細胞爬片的準備
      1、蓋玻片的選擇:
      爬片可用一般的蓋玻片,也可用專用細胞爬片(價格比較昂貴)但是細胞貼壁牢固,拍出照片效果好。
      2、爬片的剪裁:
      可根據(jù)自己的需要,到染色時再將之切開,這樣既保證了細胞均一性,又可同時做幾個指標(biāo)的染色剪裁成合適大小,置于6孔板、12孔板或24孔板。
      3、爬片的使用前處理:
      將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸泡6小時,再用三蒸水沖洗3遍。


      細胞爬片的操作
      1、胰酶消化細胞后計數(shù)重懸細胞于培養(yǎng)基中。
      2、加細胞前,根據(jù)玻片的大小,先在每個孔里準備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基,使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起,然后放玻片,防止加細胞懸液時玻片漂起,造成雙層細胞貼片。
      3、根據(jù)自己的需要選擇合適的細胞密度接入培養(yǎng)板內(nèi)即可。
      4、待細胞貼壁后,可去上清加含藥培養(yǎng)基。
      5、按照實驗設(shè)計,作用一定時間后取玻片。
      取玻片時由于玻片與培養(yǎng)皿底結(jié)合較緊,張力較大,一般將注射器針頭針尖向背面弄個小鉤,這樣將爬片輕輕勾起,用小鑷子取出就可以了。

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