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Tris-HCl緩沖液有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?
  • 發(fā)布日期:2021-08-18      瀏覽次數(shù):2436
    • 優(yōu)點(diǎn):
      ①因?yàn)門ris堿的堿性較強(qiáng),所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液;
      ②對生物化學(xué)過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。

      缺點(diǎn):
      ①緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1;
      ②溫度效應(yīng)大,溫度變化對緩沖液pH值的影響很大,即:
      △pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃時緩沖液的pH=8.4,則37℃時的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。
      ③易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。
      ④此緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

      用途:
      Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲(C. elegans)核纖層蛋白(lamin)的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH。此外,Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。 作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,最好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。

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